Бронхоальвеолярная лаважная жидкость, промывные воды бронхов, взятие материала для ПЦР. ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора

Расходные материалы и реагенты

Пробирки с винтовой горловинной крышкой объёмом 15,0 мл

Например, «Axygen, Inc.», США или аналогичные

Контейнер пластиковый для взятия, хранения и транспортировки биологических образцов для анализа объёмом 30 мл (стерильный, в индивидуальной упаковке)

Например, ООО «Комбитек Пластик», Россия или аналогичный

Одноразовые полипропиленовые завинчивающиеся или плотно закрывающиеся пробирки объёмом 1,5; 2,0 мл

Например, микроцентрифужные пробирки «Axygen, Inc.», США или аналогичные

0,9% раствор натрия хлорида стерильный (стерильный физиологический раствор)

Взятие

Бронхоальвеолярную лаважную жидкость или промывные воды бронхов в объёме от 5,0 до 50,0 мл собрать в пробирку или контейнер при проведении бронхоскопии. Пробирку или контейнер плотно закрыть крышкой.

Для контроля контаминации исследуемыми микроорганизмами или их НК рекомендуется провести предварительное взятие смывов с бронхоскопов, подготовленных для проведения процедуры бронхоскопии. С этой целью промыть канал и шланг аппарата 1,0 мл 0,9% раствора натрия хлорида. Полученный смыв перенести в пробирку для последующего тестирования. Пробирку плотно закрыть крышкой.

Хранение

Условия хранения и транспортировки материала и предварительно обработанных проб

При температуре 2–8 °С — от 1 до 3 сут (в зависимости от используемого набора реагентов);
при температуре от –24 до –16 °С — от 7 сут до 12 мес (в зависимости от используемого набора реагентов);
при температуре не выше –68 °С — длительно.

Допускается однократное замораживание–оттаивание материала (более подробную информацию см. в инструкции по применению к соответствующему набору реагентов).

Предварительная обработка

Образец бронхоальвеолярной лаважной жидкости или промывных вод бронхов перемешать на вортексе (например, центрифуге/вортексе Мульти-Спин модель «MSC-3000» (SIA «Biosan», Латвия) или аналогичном) и осадить капли со стенок пробирки и внутренней части крышки центрифугированием в течение 3–5 с. Отобрать, используя наконечник с фильтром, 1,0 мл материала и перенести в пробирку объёмом 1,5 мл. Центрифугировать 10 мин при 7 000–10 000 g (например, 10 000–12 000 об/мин для лабораторной микроцентрифуги «MiniSpin» («Eppendorf Manufacturing Corporation», Германия)). Используя наконечник без фильтра и отсасыватель медицинский, удалить супернатант, оставляя над осадком 100–200 мкл надосадочной жидкости (если иной объём не предусмотрен инструкцией по применению к набору реагентов), затем тщательно перемешать содержимое на вортексе (например, центрифуге/вортексе Мульти-Спин модель «MSC-3000» (SIA «Biosan», Латвия) или аналогичном) и осадить капли со стенок пробирки и внутренней части крышки центрифугированием в течение 3–5 с. Полученный образец использовать для экстракции НК.

Выявляемые патогены

Биологический материал используется для выявления нуклеиновых кислот следующих микроорганизмов

Бронхоальвеолярная лаважная жидкость

Промывные воды бронхов

Вирусы
Human adenovirus spp.	●
Human betaherpesvirus 5	●
Human bocavirus	●
Human coronaviruses	●
Human gammaherpesvirus 4	●
Human metapneumovirus	●
Human orthopneumovirus	●
Human parainfluenza viruses	●
Human rhinoviruses	●
Influenza A virus	●
Influenza B virus	●
MERS-CoV	●
SARS-CoV	●
SARS-CoV-2	●

Бактерии
Chlamydophila pneumoniae	●
Coxiella burnetii		●
Haemophilus influenzae	●
Legionella pneumophila	●
Mycobacterium tuberculosis complex	●	●
Mycoplasma pneumoniae	●
Pseudomonas aeroginosa	●
Staphylococcus aureus	●	●
Streptococcus pneumoniae	●

Грибы
Candida albicans	●	●
Candida glabrata	●	●
Candida krusei	●	●
Candida parapsilosis	●	●
Candida tropicalis	●	●
Cryptococcus neoformans	●
Pneumocystis jirovecii	●