Эндотрахеальный аспират

Расходные материалы и реагенты
Изображение инструмента
Пробирки с винтовой горловинной крышкой объёмом 5,0; 10,0 мл
Например, «Axygen, Inc.», США или аналогичные
0,9% раствор натрия хлорида стерильный (стерильный физиологический раствор)
Взятие

Манипуляцию провести натощак после чистки зубов и предварительного однократного полоскания полости рта 0,9% раствором натрия хлорида или кипяченой водой. Вызвать продуктивный кашель с очищением верхних дыхательных путей от мокроты путём выполнения обследуемым нескольких глубоких вдохов с последующей задержкой дыхания на несколько секунд и резкого выдоха. Затем присоединить мукус-экстрактор через трубку-переходник к отсосу, катетер для взятия трахеального аспирата ввести в глотку через ротовую полость. Вследствие раздражения слизистой в области голосовой щели спровоцировать кашлевой рефлекс и провести извлечение трахеального содержимого через катетер с помощью отсоса в пробирку или контейнер, плотно закрыть крышкой. Объём аспирата должен составлять не менее 3,0–5,0 мл.

Хранение

Условия хранения и транспортировки материала

  • При температуре 2–8 °С — в течение 24 ч;
  • при температуре от –24 до –16 °С — в течение 7 сут;
  • при температуре не выше –68 °С — длительно.

Допускается однократное замораживание–оттаивание материала.

Предварительная обработка

В ёмкость с эндотрахеальным аспиратом добавить реагент для предобработки слизистого биологического материала (например, реагент для предобработки слизистого материала «МУКОЛИЗИН» (ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, Россия) или аналогичный)  в соотношении 1:5 (1 часть эндотрахеального аспирата  к 5 частям реагента), ориентируясь по градуировке ёмкости.  В процессе разжижения эндотрахеального аспирата  (20–30 мин) ёмкость необходимо периодически встряхивать при помощи шейкера (например, «Термошейкер  PST-60HL-4» (SIA «Biosan», Латвия) или аналогичный). Затем 1,0 мл разжиженного эндотрахеального аспирата перенести в пробирку объёмом 1,5 мл, используя наконечник с фильтром, и центрифугировать 10 мин при 5 000–7 000 g (например, 8 000–10 000 об/мин для лабораторной микроцентрифуги «MiniSpin» («Eppendorf  Manufacturing Corporation», Германия) или аналогичной). Удалить супернатант, используя наконечник без фильтра и отсасыватель медицинский, оставив 100–200 мкл надосадочной жидкости и осадок. Полученную пробу  после тщательного перемешивания на вортексе (например, центрифуге/вортексе Мульти-Спин модель «MSC-3000» (SIA «Biosan», Латвия) или аналогичном) и осаждения капель со стенок пробирки и внутренней части крышки центрифугированием в течение 3–5 с использовать для экстракции НК.

Допускается экстракция НК из 100 мкл разжиженного эндотрахеального аспирата без стадии центрифугирования.

Выявляемые патогены
Биологический материал используется для выявления нуклеиновых кислот следующих микроорганизмов
Эндотрахеальный аспират
Бактерии
Legionella pneumophila
Pseudomonas aeroginosa
Staphylococcus aureus
Грибы
Candida albicans
Candida glabrata
Candida krusei
Candida parapsilosis
Candida tropicalis
Pneumocystis jirovecii