Синовиальная жидкость

Расходные материалы и реагенты
Изображение инструмента
Одноразовые полипропиленовые завинчивающиеся или плотно закрывающиеся пробирки объёмом 1,5; 2,0 мл
Например, микроцентрифужные пробирки «Axygen, Inc.», США или аналогичные
70% раствор этилового спирта
Взятие

Синовиальную жидкость отобрать методом аспирации в объёме не менее 1,0 мл в пробирку при пункции сустава пункционной иглой после предварительной обработки кожной поверхности в месте пункции 70% раствором этилового спирта и местной анестезии (например, орошение хлорэтилом или инфильтрация кожи 1% раствором лидокаина). Пробирку плотно закрыть крышкой.

Хранение

Условия хранения и транспортировки нативного материала и концентрированных проб

  • При температуре 2–8 °С — в течение 3 сут;
  • при температуре от –24 до –16 °С — в течение 12 мес;
  • при температуре не выше –68 °С — длительно.

Допускается однократное замораживание–оттаивание материала.

Предварительная обработка

Предварительная обработка проб не требуется. При необходимости можно провести концентрирование нативного материала.

Концентрирование нативного материала

Образец синовиальной жидкости перемешать на вортексе (например, центрифуге/вортексе Мульти-Спин модель «MSC-3000» (SIA «Biosan», Латвия) или аналогичном) и осадить капли со стенок пробирки и внутренней части крышки центрифугированием в течение 3–5 с. 1,0 мл материала перенести в пробирку объёмом 1,5 мл, используя наконечник с фильтром. Центрифугировать 5 мин при 8 000–9 000 g (например, 12 000–13 000 об/мин для лабораторной микроцентрифуги «MiniSpin» («Eppendorf Manufacturing Corporation», Германия). Удалить супернатант, используя наконечник без фильтра и отсасыватель медицинский, оставив 100–200 мкл надосадочной жидкости и осадок. Полученную пробу после тщательного перемешивания на вортексе (например, центрифуге/ вортексе Мульти-Спин модель «MSC-3000» (SIA «Biosan», Латвия) или аналогичном) и осаждения капель со стенок пробирки и внутренней части крышки центрифугированием в течение 3–5 с использовать для экстракции НК.

При густой консистенции исследуемого материала к образцу перед этапом центрифугирования добавить реагент для предобработки слизистого биологического материала (например, реагент для предобработки слизистого материала «МУКОЛИЗИН», ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, Россия, или аналогичный) в соотношении 1:1. В процессе разжижения материала (20–30 мин) пробирку необходимо периодически тщательно перемешивать на вортексе (например, центрифуге/вортексе Мульти-Спин модель «MSC-3000» (SIA «Biosan», Латвия) или аналогичном). Далее предварительную обработку проводить аналогично описанному выше.

Выявляемые патогены
Биологический материал используется для выявления нуклеиновых кислот следующих микроорганизмов
Синовиальная жидкость
Бактерии
Borrelia spp.
Brucella spp.
Haemophilus influenzae
Mycobacterium tuberculosis complex
Streptococcus pneumoniae
Streptococcus pyogenes