Тканевой (биопсийный, операционный, аутопсийный) материал в парафиновых блоках

Расходные материалы и реагенты
Изображение инструмента
Скальпели хирургические стерильные одноразового использования
Например, «Полимерные изделия», Россия или аналогичные
Изображение инструмента
Скарификаторы одноразовые стерильные
Например, «Медикон», Россия или аналогичные
Изображение инструмента
Медицинские одноразовые стерильные пинцеты
Например, «Полимерные изделия», Россия или аналогичные
Изображение инструмента
Одноразовые полипропиленовые завинчивающиеся конические свободностоящие пробирки объёмом 2,0 мл с крышкой
Например, «Sarstedt», Германия или аналогичные
Взятие

Тканевой (биопсийный, операционный, аутопсийный) материал в парафиновых блоках отбирается, транспортируется и хранится для проведения молекулярно-биологических исследований согласно Приказу МЗ РФ от 24.03.2016 № 179н «О правилах проведения патолого-анатомических исследований».

Внимание! Недопустимо использовать кислый формалин для фиксации тканевого (биопсийного, операционного, аутопсийного) материала.

 

Способы взятия образцов в зависимости от цели исследования

Первый способ: из парафинового блока с помощью скальпеля или скарификатора извлечь фрагмент ткани размером 2–3 мм3 (без учёта объёма парафина), намеченный для исследования врачом-патологоанатомом на готовом гистологическом препарате (на стекле). Образцы перенести в пробирку. Пробирку плотно закрыть крышкой.

Второй способ: парафиновые блоки нарезать на микротоме для парафиновых срезов, используя отдельный одноразовый нож для каждого блока. Образцы (4–5 срезов общим размером 2–3 мм3 без учёта объёма парафина) при помощи пинцета перенести в пробирку. Пробирку плотно закрыть крышкой.

Для контроля возможной кросс-контаминации на этапе гистологической проводки рекомендуется дополнительно исследовать фрагмент парафина без тканевого материала из того же парафинового блока.

Хранение

Условия хранения и транспортировки материала и предварительно обработанных проб

1) Образцы тканевого материала в парафиновых блоках:

  • при температуре 18–25 °С — длительно, не допуская плавления парафина;

2) образцы тканевого материала после депарафинизации:

  • при температуре 2–8 °С — в течение 1 мес;
  • при температуре от –24 до –16 °С — длительно.

Допускается двукратное замораживание–оттаивание материала.

Предварительная обработка

Отобранные образцы тканевого материала в парафиновых блоках депарафинизировать с помощью реагентов, предназначенных для этой цели (например, ортоксилол (О-ксилол) химически чистый или промышленно производимый депарафинизирующий агент (например, «QIAGEN GmbH», Германия или аналогичный). Затем провести серию отмывок с понижающейся концентрацией раствора этилового спирта (аналогично стандартной гистологической проводке).

В случае использования готовых растворов для депарафинизации действовать согласно инструкции по применению.

Выявляемые патогены
Биологический материал используется для выявления нуклеиновых кислот следующих микроорганизмов
Тканевой (биопсийный, операционный, аутопсийный) материал в парафиновых блоках
Вирусы
Human gammaherpesvirus 8
Бактерии
Mycobacterium tuberculosis complex
Простейшие
Leishmania spp.