Культуры микроорганизмов

Расходные материалы и реагенты
Изображение инструмента
Микробиологическая петля, стерильная на 1–10 мкл
Например, «Sarstedt», Германия или аналогичная
Изображение инструмента
Пастеровская пипетка объёмом не менее 3,0 мл
Например, «Sarstedt», Германия или аналогичная
Изображение инструмента
Одноразовые полипропиленовые завинчивающиеся конические свободностоящие пробирки объёмом 2,0 мл с крышкой
Например, «Sarstedt», Германия или аналогичные
0,9% раствор натрия хлорида стерильный (стерильный физиологический раствор)
Взятие

Предназначенные для исследования колонии микроорганизмов снять с поверхности плотной питательной среды микробиологической петлей и ресуспендировать в 0,9% растворе натрия хлорида. Визуально или с помощью денситометра определить концентрацию микроорганизмов, используя стандарт мутности. Отобрать 1,0 мл материала и перенести в пробирку, используя пастеровскую пипетку.

При исследовании культуры, выросшей на жидкой питательной среде, из оригинального флакона отобрать 1,0 мл материала и перенести в пробирку, используя пастеровскую пипетку.

Хранение

Условия хранения и транспортировки материала и предварительно обработанных проб 
(если иные требования не предусмотрены инструкцией по применению к набору реагентов)

  • При температуре 18–25 °С — в течение 24 ч;
  • при температуре 2–8 °С — в течение 7 сут;
  • при температуре от –24 до –16 °С — в течение 12 мес;
  • при температуре не выше –68 °С — длительно.

Допускается однократное замораживание–оттаивание материала.

Предварительная обработка

Содержимое пробирки тщательно перемешать на вортексе (например, центрифуге/вортексе Мульти-Спин модель «MSC-3000» (SIA «Biosan», Латвия) или аналогичном) и центрифугировать 60 с при 12 000 g (например, 13 400 об/мин для лабораторной микроцентрифуги «MiniSpin» («Eppendorf Manufacturing Corporation», Германия)). Перенести 5 мкл материала, используя наконечник с фильтром, в пробирку объёмом 1,5 мл с 95 мкл 0,9% раствора натрия хлорида. Полученную пробу после тщательного перемешивания на вортексе (например, центрифуге/вортексе Мульти-Спин модель «MSC-3000» (SIA «Biosan», Латвия) или аналогичном) и осаждения капель со стенок пробирки и внутренней части крышки центрифугированием в течение 3–5 с использовать для экстракции НК.

Пробирку с исследуемым материалом центрифугировать 10 мин при 12 000 g (например, 13 400 об/мин для лабораторной микроцентрифуги «MiniSpin» («Eppendorf Manufacturing Corporation», Германия)). Удалить супернатант, используя наконечник без фильтра и отсасыватель медицинский, оставив 100–200 мкл надосадочной жидкости и осадок. Полученную пробу после тщательного перемешивания на вортексе (например, центрифуге/вортексе Мульти-Спин модель «MSC-3000» (SIA «Biosan», Латвия) или аналогичном) и осаждения капель со стенок пробирки и внутренней части крышки центрифугированием в течение 3–5 с использовать для экстракции НК.

Выявляемые патогены
Биологический материал используется для выявления нуклеиновых кислот следующих микроорганизмов
Культуры микроорганизмов
Бактерии
Brucella spp.
Cronobacter sakazakii
Listeria monocytogenes
Mycobacterium tuberculosis complex
Salmonella spp.
Salmonella typhi
Shigella dysenteriae type 1
Shigella spp.
Vibrio cholerae
Yersinia enterocolitica
Yersinia pseudotuberculosis