Цельная венозная или пуповинная кровь

Расходные материалы и реагенты
Изображение инструмента
Вакуумная пробирка для взятия венозной крови с К2/К3 ЭДТА для гематологических исследований
Например, вакуумная пробирка «Vacuette® Premium К2 EDTA» («Greiner Bio-One GmbH», Австрия) или аналогичная
Изображение инструмента
Система вакуумного забора крови
Например, система вакуумного забора крови «Vacuette®» с принадлежностями («Greiner Bio-One GmbH», Австрия) или аналогичная
Взятие

Взятие венозной крови рекомендуется производить натощак или через 3 ч после приёма пищи из локтевой вены в положении сидя. Взятие пуповинной крови осуществлять при проведении кордоцентеза.

Взятие крови произвести в пробирку с 6% ЭДТА.

Гепарин в качестве антикоагулянта использовать нельзя!

Закрытую пробирку с кровью сразу после взятия несколько раз плавно перевернуть вверх дном, чтобы кровь в пробирке с антикоагулянтом тщательно перемешалась. После плавного перемешивания пробирку поместить в штатив.

Хранение

Условия хранения и транспортировки материала

1) До проведения предварительной обработки/ ПЦР-исследования:

  • при температуре 18–25 °С — в течение 2 ч;
  • при температуре 2–8 °С — в течение 3 сут

с момента взятия биологического материала.

Недопустимо замораживание образцов цельной крови!

2) после предварительной обработки проб (если иное не предусмотрено инструкцией по применению к набору реагентов):

  • при температуре от –24 до –16 °С — в течение 12 мес.

Допускается однократное замораживание– оттаивание материала.

Предварительная обработка

250 мкл цельной крови перенести в пробирку объёмом 1,5 мл, используя наконечник с фильтром. Добавить 1,0 мл реагента для селективного лизиса эритроцитов крови (цельной венозной и пуповинной крови) (например, реагент для предобработки цельной периферической и пуповинной крови «ГЕМОЛИТИК» (ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, Россия),  РУ № ФСЗ 2010/09505, или аналогичный). Аккуратно перемешать содержимое пробирки на вортексе (например, центрифуге/вортексе Мульти-Спин модель MSC-3000 (SIA  «Biosan», Латвия)) и оставить на 10–15 мин при температуре 18–25 °С, периодически перемешивая на вортексе.  Центрифугировать 3 мин при 4000 g (например, 8000 об/мин для лабораторной микроцентрифуги «MiniSpin» («Eppendorf Manufacturing Corporation», Германия) или аналогичной).  Супернатант отобрать, используя наконечник без фильтра  и отсасыватель медицинский, оставив 100 мкл надосадочной жидкости и осадок. После отмывки осадок клеток должен быть белым, допускается наличие только небольшого  налета розоватого цвета над осадком (остатки разрушенных эритроцитов). При необходимости можно повторить отмывку реагентом для селективного лизиса эритроцитов крови (цельной венозной и пуповинной крови). Полученный осадок должен быть немедленно лизирован (например, в случае экстракции НК с помощью набора реагентов «РИБО-преп» (ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, Россия), РУ № ФСР 2008/03147) добавить 300 мкл лизирующего раствора и в последующем экстрагировать НК в соответствии  с инструкцией по применению, не добавляя раствор для лизиса повторно).

Условия хранения предварительно обработанных проб
(если иное не предусмотрено инструкцией по применению к набору реагентов)

  • При температуре от –24 до –16 °С — до 12 мес.

Допускается однократное замораживание–оттаивание материала.

Выявляемые патогены
Биологический материал используется для выявления нуклеиновых кислот следующих микроорганизмов
Кровь венозная (цельная) Кровь пуповинная (цельная)
Вирусы
Human alphaherpesvirus 1
Human alphaherpesvirus 2
Human alphaherpesvirus 3
Human betaherpesvirus 5
Human betaherpesvirus 6 A/B
Human betaherpesvirus 7
Human gammaherpesvirus 4
Human gammaherpesvirus 8
Human immunodeficiency virus (DNA)
Marburg virus
Primate erythroparvovirus 1
Rubella virus
Sudan ebolavirus
Zaire ebolavirus
Zika virus
Бактерии
Bacillus anthracis
Borrelia miyamotoi
Brucella spp.
Escherichia coli
Haemophilus influenzae
Listeria monocytogenes
Proteus spp.
Pseudomonas aeroginosa
Rickettsia conorii
Salmonella spp.
Salmonella typhi
Staphylococcus aureus
Streptococcus agalactiae
Streptococcus pneumoniae
Streptococcus pyogenes
Грибы
Candida albicans
Candida glabrata
Candida krusei
Candida parapsilosis
Candida tropicalis
Cryptococcus neoformans
Простейшие
Leishmania spp.
Plasmodium spp.
Plasmodium vivax
Toxoplasma gondii